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酵母樣真菌對兒童和青少年1型糖尿病的脂代謝和血管內皮生長因子水平無影響

beplay怎么下载安装體積42，文章號:107（2016）引用本文

摘要

背景

該研究的目的是研究血管內皮生長因子(VEGF)水平與脂代謝和酵母樣真菌在兒童和青少年1型糖尿病(T1DM)消化道定植的數量之間的關係。

方法

該研究包括45名患有T1DM的兒童和27名年齡和性別匹配的健康對照受試者。在研究樣本中，33例T1DM患者接受胰島素泵治療，12例T1DM患者接受胰島素筆裝置每日多次注射。所有T1DM患者均無微血管和大血管並發症。在T1DM患者和健康對照組中進行生化測試，並對消化道定植的酵母樣真菌進行測量。此外，所有研究對象均采用ELISA檢測血清VEGF水平。

結果

患有T1DM和酵母樣真菌菌落的兒童和青少年亞組數量為10^3.與含有酵母樣真菌的T1DM患者相比，CFU/g可顯著降低HbA1c水平，降低總膽固醇、LDL膽固醇和VEGF水平，但無統計學意義10^6CFU / g。此外，與酵母樣真菌數量較多的T1DM患者相比，該亞組觀察到HDL水平較高10^6CFU/g，但差異無統計學意義。

結論

我們的研究表明，酵母樣真菌對兒童和青少年T1DM患者的脂代謝和VEGF水平沒有影響。對T1DM患者進行綜合治療，在個人胰島素泵的幫助下進行強化胰島素治療，可以減少或預防糖尿病長期並發症的發生。這一領域還需要進一步研究。

背景

根據現有資料，高血糖是導致糖尿病血管病變並發症發生的主要因素[1- - - - - -3.］．糖尿病的代謝控製是影響長期血管病變並發症風險的最重要因素之一，但不是唯一的因素[4- - - - - -7］．多項證據表明，當高血糖伴有脂代謝紊亂和高血壓值時，長期糖尿病並發症的風險會增加[3.，6，8］．在我們之前的研究中，我們發現兒童和青少年1型糖尿病(T1DM)患者的收縮壓值與血清血管內皮生長因子(VEGF)水平之間存在相關性[8］．VEGF是內皮細胞的有絲分裂和趨化因子，從而刺激血管生成。VEGF可以增加血管通透性，促進水腫，並促進細胞從循環血液遷移到炎症部位。VEGF是引發慢性疾病炎症過程的重要因素[9］．

預防長期並發症是T1DM患者最重要的治療目標之一。所有T1DM患者必須監測糖化血紅蛋白水平、脂質代謝參數、血壓和其他已知的長期血管並發症危險因素[5，10，11］．此外，必須注意的是，在過去十年中，波蘭和世界各地對T1DM兒童和青少年的治療已經發生了重大變化[12- - - - - -14］．首先，新的胰島素治療技術已經開發和實施，例如與持續血糖監測係統(CGM)集成的個人胰島素泵[14，15］．臨床試驗和免疫學研究的數據指出，即使是微小的血糖波動在微血管和大血管並發症的發展中也起著非常重要的作用[15- - - - - -17］．

此外，酵母樣真菌在糖尿病過程中的作用尚未完全闡明[18- - - - - -20.］．在人體內發現的抗原觸發先天免疫反應和適應性免疫反應的機製，彼此密切相關。一方麵，它們可以消除致病因素，但另一方麵，它們可以導致全身疾病甚至死亡[21，22］．我們的團隊和其他研究人員正在努力研究酵母樣真菌的毒力及其在T1DM患者中的後遺症[20.，21，23］．然而，證明T1DM患者感染與並發症發展之間的因果關係仍然是一個巨大的挑戰。在許多情況下，主要問題是在接觸酵母樣真菌抗原和出現長期血管病變並發症的臨床體征和症狀之間有很長的潛伏期[22］．因此，我們目前研究的目的是在選定的脂代謝參數和酵母樣真菌在T1DM兒童和青少年消化道定植的情況下，研究VEGF水平。

方法

該研究涉及45名患有T1DM的青少年患者(16名女孩和29名男孩)。根據波蘭糖尿病協會的指南診斷糖尿病，該指南與世界衛生組織的指南相一致[12，24］．所有T1DM患者均無微血管和大血管並發症。由糖尿病專家、護士、營養師、心理學家、物理治療師、教育家組成的糖尿病治療團隊對T1DM患兒及其父母/法定監護人進行全麵護理。在研究樣本中，33例T1DM患者接受胰島素泵治療，12例T1DM患者接受胰島素筆裝置每日多次注射。血糖水平由連續血糖監測係統(CGMS)測量，使用與“Guardian”設備或美敦力胰島素泵(Medtronic Minimed, Northridge, CA)兼容的電極。糖化血紅蛋白(HbA1c)采用免疫濁度法測定，使用Unimate 3試劑盒(Hoffmann-La Roche AG，巴塞爾，瑞士)。當地實驗室估計的健康人參考值為4.3 ~ 5.7% (35 ~ 42 mmol/mol)。采用Tina-quant試劑盒(Boehringer Mannheim GmbH, Germany)免疫濁度法測定尿白蛋白。當3個尿液樣本中至少有2個每天白蛋白排泄量在30 - 300mg /24小時之間時，診斷為微量白蛋白尿，這些尿液樣本收集於控製良好的糖尿病患者，無酮症酸中毒的臨床或實驗室體征。血清總膽固醇、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)膽固醇水平由ARCHITECT cSystem和AEROSET檢測，雅培公司，德國威斯巴登。 Lipid profile was assessed according to the value [25］．采用24小時血壓監測(ABPM)方法測量血壓。袖帶的大小根據研究對象的年齡、體重和臂圍而不同。所有的ABPM結果，其技術上正確的測量低於80%被排除在研究之外。根據分位數表確定正常血壓值、高血壓前期和高血壓狀態範圍的閾值，分位數表考慮了性別、年齡和身高分位數。當至少三次獨立測量的平均ABPM值高於相應年齡、性別和身高的第95百分位時，即可診斷為動脈高血壓[26］．

為了計數1g糞便中的酵母樣真菌菌落，使用Sabouraud Dextrose瓊脂進行定量培養。測試材料是來自T1DM兒童和健康對照受試者的新鮮糞便樣本。樣品被收集到無菌容器中，並進行進一步的測試程序。製備正常生理鹽水中按1:10、1:100、1:100、1:100、1:100 000稀釋的糞便懸浮液，在37℃下孵育72 h。根據在1 g糞便中生長的菌落形成單位的數量，建立了以下真菌生長的指標值:從0到10^3.CFU/g大於10^3.到10 ^6CFU / g。

T1DM患者及其匹配的對照組在收集糞便樣本當天由兒科醫生進行檢查。兩組患者均進行了病史和體格檢查，未發現任何胃腸疾病。此外，研究參與者在參與研究前3個月沒有服用抗生素。除糖尿病外，有感染症狀或全身疾病的兒童被排除在研究之外。研究中T1DM患者分為兩個亞組:病程≤5年和病程為>5年。

對照組為健康兒童青少年27例，年齡和BMI相匹配(女13例，男14例)。

研究人員從參與研究的所有兒童和青少年或其父母或監護人處獲得書麵知情同意。這項研究得到了格達斯克醫科大學倫理委員會的批準(編號NKBBN/125/2014)，調查是根據1996年修訂的《赫爾辛基宣言》的原則進行的。

血清VEGF水平

采用免疫酶聯免疫法檢測血清血管內皮生長因子水平(Quantikine High Sensitivity Human by R&D System, Minneapolis, Minn。，美國)根據製造商協議。製造商確定最小可檢測濃度為5.0 pg/ml。根據實驗室的質量控製數據，在20個重複中確定了分析的精密度，分析內為53.7，分析間為910。

統計分析

統計分析使用RKWard數據分析工具0.6.1版本，使用KDE開發平台4.13.3 [27］．采用夏皮羅-威爾克檢驗(Shapiro-Wilk’s test)評價變量的正態性。組間差異用T Student檢驗或非參數U Mann Whitney檢驗計算。在所有分析中，雙尾顯著性水平<0.05被認為具有統計學意義。采用單變量和多變量logistic正回歸分析評估VEGF與臨床參數和1 g糞便中酵母樣真菌菌落之間的關係p入口< 0.05。

結果

研究參與者的臨床特征

該研究涉及45名患有T1DM的兒童和青少年，年齡9.2 +/−3.6歲，27名健康兒童和青少年，年齡9.8 +/−4.5歲。T1DM組HbA1c水平明顯高於T1DM組p= 0.005，白蛋白排泄率p= 0.007, VEGFp與對照組相比= 0.001。年齡差異無統計學意義p= 0.65, bmip= 0.59，總膽固醇p= 0.214, ldl -膽固醇p= 0.214和hdl -膽固醇水平p= 0.098，與健康對照組相比。所研究的T1DM患者及對照健康受試者的臨床特征見表1．

表1 T1DM患者和健康對照組的臨床特征
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T1DM患者根據病程的臨床特征

病程≤5年的T1DM患者亞組年齡較年輕，p= 0.03，達到最優代謝控製，p= 0.01，而T1DM患者的糖尿病病程為>年。病程≤5年的T1DM患者總膽固醇水平較低，p= 0.49，低密度脂蛋白水平，p= 0.56, VEGF水平較低，p= 0.37，盡管這些差異均無統計學意義。糖尿病病程較短的患者HDL膽固醇水平明顯高於病程為>年的T1DM患者(表2)2)．

表2 T1DM患者不同病程的臨床特征
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T1DM患者的臨床特征根據酵母樣真菌在消化道定植的數量

患有T1DM和酵母樣真菌菌落的兒童和青少年亞組數量為10^3.CFU/g顯著降低HbA1c水平，p= 0.01，總膽固醇和LDL膽固醇水平較低，但無統計學意義，VEGF水平較低，但無統計學意義10^6CFU / g。此外，與酵母樣真菌數量較多的T1DM患者相比，該亞組觀察到HDL水平較高10^6CFU / g,p= 0.41，但差異無統計學意義(表3.)．

表3 T1DM患者消化道定植酵母樣真菌數量的臨床特征
全尺寸表

T1DM患者糖尿病病程與臨床參數關係的探討

在T1DM兒童中，糖尿病病程與VEGF水平呈正相關，但無統計學意義;Rs = 0.113，p= 0.44(圖1)．

圖1
圖1

T1DM患者血清VEGF水平與糖尿病病程的相關性

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T1DM兒童和青少年血清VEGF水平與血脂關係的研究

在T1DM患兒組中，血清VEGF與總膽固醇水平呈正相關，Rs = 0.105。p= 0.459(圖2)， VEGF和LDL膽固醇水平之間，Rs = 0.005，p= 0.973(圖2 b)．VEGF與hdl -膽固醇水平呈負相關，Rs = 0.002。p= 0.988(圖2攝氏度)．

圖2
圖2

一個T1DM患者血清VEGF與總膽固醇水平的相關性bT1DM患者血清VEGF與ldl -膽固醇水平的相關性cT1DM患者血清VEGF與hdl -膽固醇水平的相關性

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在研究的下一步進行了logistic回歸分析，結果顯示糖化血紅蛋白和血脂對T1DM患者的VEGF水平沒有影響(表2)4)．

表4 Hb1A和血脂水平對T1DM患者VEGF水平影響的Logistic回歸分析結果
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討論

我們之前的研究和其他作者的研究表明，5年後會出現長期的糖尿病並發症[1，4，8］．因此，為了進行分析，研究中的T1DM患者被分為兩個亞組:糖尿病病程≤5年的患者和病程為>5年的患者。在我們的研究中，T1DM病程≤5年、HbA1c水平(7.0 + 1.2%)的兒童和青少年亞組與病程為>年、HbA1c水平(8.1 + 0.9%)的T1DM患者相比，總膽固醇和LDL膽固醇水平無顯著差異。與病程為>年的T1DM患者相比，病程<5年的T1DM患兒HDL膽固醇水平更高，HbA1c = 7.0 + 1.2%， HbA1c = 8.1 + 0.9%。目前關於T1DM患者脂質代謝的數據並不一致[6，28- - - - - -30.］．最近，科學家取得了意想不到的結果克萊因等人對730例患者進行了24年的研究，每個患者都進行了4次檢測，並沒有顯示T1DM患者中氧化低密度脂蛋白血清水平升高與黃斑水腫頻率或糖尿病視網膜病變嚴重程度之間存在任何關係[28］．在其他研究中，作者指出了疾病持續時間超過5年、代謝控製不良和心血管並發症患者的血脂異常[6，29，30.］．

在我們的研究中，T1DM和病程≤5年的患者與病程為>年的T1DM患者血清VEGF水平無顯著差異。在T1DM兒童中，VEGF水平與糖尿病病程、總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇水平之間的相關性無統計學意義。VEGF血清水平與脂代謝或HbA1c水平之間缺乏相關性，部分原因是T1DM患者胰島素治療方法的改進，部分原因是HDL膽固醇的抗炎作用。

我們的結果與其他作者的發現一致，他們發現T1DM胰島素泵患者血清VEGF、CRP和HDL膽固醇水平呈負相關[31］．作者認為，胰島素泵治療可以顯著提高HDL膽固醇水平，從而降低CRP和VEGF水平。T1DM患者使用胰島素泵持續輸注胰島素可預防動脈粥樣硬化進展，從而降低心血管疾病的風險[31］．不可否認的是，我們之前的研究和其他作者的研究顯示，患有T1DM的兒童和青少年血清VEGF水平在統計學上顯著升高[32- - - - - -35］．然而，T1DM兒童和青少年研究組年齡較大，代謝控製較差，臨床上有明顯的糖尿病視網膜病變(DR)、腎病和動脈高血壓[8，32- - - - - -35］．在我們目前的研究中，T1DM患者無長期糖尿病並發症，糖尿病史較短，糖化血紅蛋白水平較低。

在研究的最後一步，研究了酵母樣真菌對脂質剖麵和VEGF水平的影響。在研究組T1DM兒童和青少年中酵母樣真菌的數量為10^3.與T1DM患者相比，CFU/g顯著降低HbA1c水平，降低總膽固醇，LDL膽固醇和血清VEGF水平，酵母樣真菌在消化道定植10^6CFU / g。我們認為，在糖尿病病程較短(<5年)、代謝控製良好且脂質譜正常的患者中，消化道中酵母樣真菌的患病率沒有顯著增加。這可能與兒童在收集糞便樣本前3個月沒有抱怨任何胃腸問題，也沒有接受任何抗生素治療有關。更重要的是，約75%的T1DM患者接受了胰島素泵與連續血糖監測係統集成的胰島素治療。必須強調的是，由於使用了個人胰島素泵和連續血糖監測係統，患有T1DM的兒童目前越來越頻繁地達到HbA1c目標水平[13- - - - - -15］．為T1DM兒童及其父母和/或法定監護人提供綜合護理教育。教育激勵患者應對胰島素治療的挑戰，消除壓力，防止對未來的焦慮[10］．

結論

我們的研究表明，在T1DM患者中，血清VEGF水平與脂代謝沒有關係，酵母樣真菌對VEGF水平沒有影響。對T1DM患者進行綜合治療，在個人胰島素泵的幫助下進行強化胰島素治療，可以減少或預防糖尿病長期並發症的發生。這一領域還需要進一步研究。

縮寫

體重指數:

身體質量指數

cgm:

連續血糖監測係統

菲律賓:

舒張壓

博士:

糖尿病性視網膜病變

DV:

因變量

高密度脂蛋白:

高密度脂蛋白膽固醇

hsCRP:

高敏c反應蛋白

低密度脂蛋白:

低密度脂蛋白膽固醇

SBP:

收縮壓

T1DM:

1型糖尿病

VEGF:

血管內皮生長因子

參考文獻

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    文章穀歌學者

下載參考

致謝

這項研究由格達斯克醫科大學資助(補助金:ST-108和ST-120)。

數據和材料的可用性

所有患者的原始數據和資料都可以在大學醫院的電子係統中獲得。因此，數據不會被共享。

作者的貢獻

KZ, BK參與工作設計，分析和解釋數據。此外，他們還起草了手稿。BK和MSK參與了標本和臨床資料的采集。BK進行了血清學測試。PW進行統計分析。MM和MSK參與患者的臨床評估，提供臨床專業知識。KZ和MM對手稿進行了嚴格的修改，並批準了最終版本。所有作者都閱讀並批準了最終的手稿。

相互競爭的利益

作者宣稱他們之間沒有利益衝突。

發表同意書

不適用。

倫理批準並同意參與

研究人員從參與研究的所有兒童和青少年或其父母或監護人處獲得書麵知情同意。這項研究得到了格達斯克醫科大學倫理委員會的批準(編號NKBBN/125/2014)，調查是根據1996年修訂的《赫爾辛基宣言》的原則進行的。

聲明

從參與研究的個體參與者(所有16歲以下兒童)的父母處獲得知情同意。研究程序由我們的研究倫理委員會批準。

作者信息

作者指出

    作者及隸屬關係

    1. 格達斯克醫科大學免疫生物學和環境微生物學係，波蘭格達斯克達基賓基7號，80-211

      Katarzyna Zorena

    2. 波蘭格達斯克醫科大學海洋和熱帶醫學研究所熱帶醫學和流行病學係

      貝亞特Kowalewska

    3. 波蘭格達斯克醫科大學兒科、糖尿病和內分泌科診所

      maiggorzata Szmigiero-Kawko & maiggorzata myievwiec

    4. 波蘭格達斯克醫科大學核醫學係

      彼得亞雷Wąż

    作者
    1. Katarzyna Zorena
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    2. 貝亞特Kowalewska
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    3. 馬łgorzata Szmigiero-Kawko
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    4. 彼得亞雷Wąż
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    5. 我媽łgorzataśliwiec
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    引用本文

    Zorena, K, Kowalewska, B, Szmigiero-Kawko, M。et al。酵母樣真菌對兒童和青少年1型糖尿病的脂代謝和血管內皮生長因子水平無影響。兒科J醫院42， 107(2016)。https://doi.org/10.1186/s13052-016-0317-9

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    關鍵字

    • 1型糖尿病
    • 兒童及青少年
    • 脂質代謝
    • 血管內皮生長因子
    • 類酵母菌

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    ISSN: 1824 - 7288

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