侏儒症患兒同時聯合精氨酸可樂定刺激試驗中胃饑餓素和生長激素的動態血清水平

背景

聯合同時精氨酸可樂定刺激(CSACS)試驗是檢測Ghrelin更合適的刺激，因為它不影響糖代謝。

方法

將50例青春期前侏儒症患兒分為正常生長激素(NGH)組和生長激素缺乏(GHD)組，生長激素(GH)峰值截斷值為10 μg/l。兩組在30、60和120分鍾GH激發試驗後測定GH和Ghrelin血清水平，並在6個月後測定骨齡的身高標準差評分(SDS)。

結果

參與者被分為天然氣水合物(n= 24)和GHD組(n= 26)。在生長激素高峰前，生長激素兒童體內循環的胃饑餓素水平下降，而生長激素兒童體內的生長激素和胃饑餓素水平均上升。GHD組Ghrelin水平高於天然氣水合物組，GH峰值低於天然氣水合物組。CSACS治療6個月後，兩組小鼠的身高SDS均增加。

結論

雖然在GHD組未檢測到類似的變化，但在天然氣水合物中GH和Ghrelin呈負相關，表明GH和Ghrelin之間存在負反饋。

侏儒症可以被定義為比平均身高低兩個標準差以上或低於第三個百分位數(就性別和年齡而言)[1，2，3.］．軟骨發育不全和生長激素缺乏(GHD)是大多數兒童侏儒症的原因。在排除其他嚴重疾病的情況下，GHD的診斷通常通過生長激素(GH)激發試驗來確定，可以選擇不同的生長激素促分泌劑(胰島素、可卡因定、胰高血糖素、精氨酸和左旋多巴)來檢測GH峰值[4，5］．為了改善這種歧視，建議進行連續測試。值得注意的是，下丘腦/垂體軸下調會影響進一步的連續試驗，這使得GHD的診斷成為一個臨床挑戰[6］．

胃促生長素(Ghrelin)是胃腸道胃促生長素能細胞產生的一種28個氨基殘基肽激素，最初被認為具有生長激素釋放功能，可作為生長激素促分泌受體1α的內源性配體。由於胰高血糖素和胰島素與葡萄糖代謝密切相關，因此使用胰高血糖素或胰島素刺激生長激素可能不適用於檢測胃饑餓素。

可樂定作為α-腎上腺素能激動劑用於降壓藥，不影響糖代謝，不僅能抑製生長抑素刺激GH的釋放，還能增加生長激素釋放激素的分泌。精氨酸可抑製生長抑素的釋放。因此，精氨酸和可樂定聯合試驗可能是檢測胃饑餓素更合適的刺激。對精氨酸與可樂定聯合試驗的敏感性和特異性進行了優化研究，縮短了檢測時間進程[7，8]而按順序的管理方式改為同時交付[9，10，顯示出類似甚至更好的診斷準確性。

本研究對兒童侏儒進行同時精氨酸可樂定刺激(CSACS)和治療，並監測血清Ghrelin和GH的動態水平。

主題

本研究於2016年3月至2018年3月在揚州市江都人民醫院招募50名侏儒症或生長受限兒童(男27例，女23例，年齡8 ~ 12歲)。入組前對患兒進行全麵體檢、生化(腎、肝、甲狀腺功能)、神經係統檢查，無嚴重慢性疾病、宮內發育遲緩、無明顯個人病史。采用生長曲線圖計算標準偏差評分(SDS)，如既往報道[11，12］．所有研究程序均經揚州江都人民醫院倫理委員會批準，並獲得所有參與者監護人的知情書麵同意。

同時聯合精氨酸可樂定刺激

CSACS測試按先前報道進行[10］．快速過夜後，在肘前靜脈置靜脈導管注入精氨酸(鹽酸精氨酸，10%溶液，Sigma, St. Louis, MO, USA)，劑量0.5 g/kg(最大30 g，超過30分鍾)，口服氯硝定(Catapresan, Boehringer, Germany)，劑量0.15 mg/m²．在整個過程中嚴格監測血壓，並在輸注精氨酸後的基線、30、60、120 min采血。

生長激素儲備或生長激素反應峰值由CSACS後血清峰值濃度生化定義。采用免疫放射測定法(IRMA)測定血清GH水平(Auto Delfia, Wallac Turku, Finland)，最低檢出限為0.01 μg/l。臨界值為10 μg/l，將侏儒症患者分為GHD組和正常生長激素(NGH)組。

Ghrelin和IGF-1檢測

商業化的放射免疫分析試劑盒(Phoenix Pharmaceuticals, Inc.)Belmont, CA, USA)采用兔抗辛烷化人胃饑餓素多克隆抗體和一種抗辛烷化人胃饑餓素抗體測定血清胃饑餓素水平¹²⁵標胃饑餓素示蹤劑。胰島素樣生長因子1 (IGF-1)水平由全自動雙點化學發光免疫分析法(Nichols Advantage®，Nichols研究所診斷)測定。

身高標準差得分

通過身高標準差評分(SDS)的比較，證實了CSACS對生長的影響，SDS顯示了低於或高於身高平均值的標準偏差數[13］．

統計分析

一個t-test評估GHD組與NGH組的差異。配對樣本t-test用於計算CSACS期間不同時間間隔與基線相比的變化。

同時聯合精氨酸可樂定刺激可提高GHD血清胃饑餓素水平

將50例被診斷為侏儒症的兒童根據臨界值(峰值GH, 10 μg/l)進一步分為兩組:GHD組(n= 26)和天然氣水合物組(n= 24)。參與者的相關臨床和生化特征見表1兩組在性別、年齡、體重、身高和基線胃饑餓素水平上沒有差異。與天然氣水合物組相比，GHD組血清GH峰值水平降低(圖1)。1一個,p< 0.01)和IGF-1(圖;1b,p< 0.05)。

CSACS試驗後，GHD患者在30、60和120分鍾時血清胃饑餓素水平較基線升高，而天然氣水合物組循環胃饑餓素水平低於基線。與天然氣水合物組相比，GHD組的Ghrelin水平在30 (p< 0.05)， 60 (p< 0.01)和CSACS檢查後120 min (p < 0.01)(圖。2）.

圖中顯示了NGH和GHD組中Ghrelin和GH的平均波動。3.．GHD組的Ghrelin水平在CSACS 30、60和120 min後升高，而天然氣水合物組的Ghrelin水平下降。與基線相比，GHD組的GH水平在30分鍾下降，在60和120分鍾顯著增加。3.a)，而在NGH組中，與前一個時間間隔相比，在30 min和60 min時生長激素增加，隨後生長激素分泌略有減少(圖1)。3.b).與GHD組相比，NGH組在30、60、120 min時GH水平較高。值得注意的是GHD組血清Ghrelin和GH水平具有明顯的相關性。

精氨酸和可樂定處理可加速骨齡的身高SDS

CSACS治療6個月均可增加NGH組和GHD組骨齡高度SDS，可作為衡量生長預後的指標。刺激試驗後負分值逐漸降低，表明NGH組和GHD組兒童的生長加速逐漸增加，並逐漸接近平均身高(圖2)。4）.

動態檢測表明，CSACS對GHD組和天然氣水合物組的Ghrelin和GH反應模式不同。與天然氣水合物參與者相比，GHD組的Ghrelin水平在CSACS試驗後的30、60和120分鍾較高，而GHD組的GH峰值低於天然氣水合物組。在天然氣水合物組中，循環胃饑餓素與生長激素在生長激素峰值前呈負相關;而在GHD組中，血清GH水平的升高伴隨著循環加速的Ghrelin。GHD組和NGH組的Ghrelin和GH的動態變化模式很難解釋，因為這些受試者可能具有不同的遺傳特征[14，15，招募的參與者樣本相對較少[16，17］．目前的研究結果需要在未來更大規模的臨床試驗中得到證實，並應考慮更詳細的遺傳信息。

雖然Ghrelin不是生長激素合成和分泌的主要刺激因子，但它具有明顯的生長激素刺激活性，可以連接胃腸-垂體軸，與生長激素促分泌受體結合，刺激IP3信號轉導通路，促進生長激素釋放[18］．而在我們的研究中，在GH高峰前，GHD組循環GH的升高與Ghrelin呈正相關，與NGH組的Ghrelin呈負相關，說明Ghrelin可能受到CSACS刺激GH分泌的抑製，GH與Ghrelin之間可能存在一個反饋回路。

身高的增長主要是由於軟骨細胞的增殖和生長板的肥大，這可以歸因於生長激素的刺激[19，20.］．IGF-1又稱生長激素C，是GH作用的主要中介物，在兒童生長發育和成人合成代謝過程中發揮著重要作用。Mecasermin是一種合成的IGF-1類似物，用於治療生長衰竭。由於IGF-1的分泌可維持恒定的日水平，而GH的日波動較大，故將IGF-1作為GH分泌的替代指標[21，22]，結果證明它對診斷GHD不夠敏感[23，24］．我們的研究表明GH和IGF-1在NGH和GHD組中都有一定的正相關關係。

總之，我們的研究結果表明，CSACS不僅可以刺激GH分泌，而且可以增加NGH組和GHD組骨齡高度SDS。Ghrelin和GH的動態分泌檢測表明GH和Ghrelin之間存在某種負調控或反饋機製。CSACS可作為一種加速生長的方法，其結果有待進一步研究證實，並更好地解釋Ghrelin和GH之間的關係和潛在機製。

CSACS可用於動態檢測Ghrelin和GH，並可促進侏儒症患兒的生長發育。

原子鍾:

同時聯合精氨酸可樂定刺激

“大酒店”:

生長激素

GHD:

生長激素缺乏症

已:

正常的生長激素

SDS:

標準偏差的分數

不適用。

資金

本研究由鎮江市科技計劃(社會發展)項目(SH2015036)資助。

數據和材料的可用性

在研究過程中產生或分析的所有數據都包含在這篇發表的文章中。

作者和聯係

1. 揚州市東方紅路9號揚州市江都人民醫院兒科

   周重

2. 江蘇大學附屬江濱醫院，中國鎮江

   Rongzeng杜

貢獻

GZ, RD進行了實驗，對數據進行了分析和解釋。RD寫了手稿。兩位作者閱讀並批準了最終稿。

相應的作者

對應到Rongzeng杜．

倫理認可和同意參與

所有參與者均已給予知情和書麵同意。本研究經揚州江都人民醫院倫理委員會批準，遵循1975年《赫爾辛基宣言》的倫理準則。

同意出版

所有參與者均已同意發表。

獲得了參與者的書麵知情同意，以便在本手稿中發表他們的個人細節。同意書由作者所在的機構持有，並可由主編查閱。

相互競爭的利益

作者聲明他們之間沒有利益衝突。

出版商的注意

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再版和權限